Tecnologia R.G.C.C.

BASIC METHODOLOGY AND ASSAY

1. A primeira inovação está na seleção da amostra mais adequada:

É bem definida e largamente aceita na comunidade científica de que o tumor primário consiste no estroma [fibroblastos, monócitos, linfócitos, etc.] e as células malignas que [são em-homogêneo] como eles são compostos a partir de diferentes subgrupos e sub clones com diferentes características e capacidades. Apenas poucas populações irão desenvolver a capacidade metastática que irá permitir-lhes invadir o tecido circundante, passar para a circulação e executar a transição de epitelial para mesenquimal (EMT). Estes são conhecidos como as Células Circulantes de Tumos [CTC’s]. Uma grande proporção de CTCs são realmente as células-tronco de câncer. Estas células têm todas as informações e capacidade necessárias para microcolonização e micrometástases e que irão mais tarde se desenvolver em potentes micrometástases. Por esta razão R.G.C.C. selecionou amostras de sangue como a forma mais adequada para a análise, uma vez que inclui as células de câncer com informações relevantes tanto para o cálculo do risco quanto para as metástases potentes.

II. Inovação para encontrar e isolar as CTCs:

R.G.C.C. utiliza poderosos classificadores e citometros de fluxo, bem como seleção negativa baseada na interrogação. Nós somos capazes de isolar as CTCs relevantes e não enriquecê-las, portanto, conseguimos ter uma amostra pura de CTCs e simultaneamente coletar todo o grupo de CTCs a partir de uma única amostra de sangue.

III. Expansão adequada das CTCs:

As CTCs irão expandir como a “célula-tronco de câncer” como célula e, em seguida, entrar em uma fase exponencial de crescimento, o que irá gerar um número respeitoso de células-tronco circulantes (CSCs) em um curto período de tempo. Ao mesmo tempo que conseguem manter intacta tanto o genótipo e o fenótipo das células, evitam qualquer alteração nas células-tronco circulantes primárias. Assim, seguindo a expansão final vamos ter mantido o genótipo idêntico.

IV. Verificação de Quimiosensitividade / Quimioresistência em ensaios de viabilidade:

As informações obtidas a partir da análise da expressão gênica será validada em uma micro cultura onde o efeito de cada substância indicada será testada. Estes ensaios ultrapassam o problema da linearidade entre a expressão dos genes e os níveis de expressão de proteína.

V. Perfil Gene-expressivo das CSCs:

As células expandidas serão analisadas para um perfil expressivo de uma análise microarray do genoma. Por isso, agora temos todas as informações sobre o rastreio epigenético das CSCs. Este perfil irá nos indicar quais terapias as CSCs serão sensíveis ou resistentes.

INFORMAÇÃO EXTRAÍDA DO DOCUMENTO (Basic Methodology and Assay) NO WEBSITE DA RGCC

BASIC METHODOLOGY AND ASSAY

1. A primeira inovação está na seleção da amostra mais adequada:

II. Inovação para encontrar e isolar as CTCs:

III. Expansão adequada das CTCs:

IV. Verificação de Quimiosensitividade / Quimioresistência em ensaios de viabilidade:

V. Perfil Gene-expressivo das CSCs:

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